果蝇是遗传学研究中常用的模式生物之一,是生物学研究中的重要材料。随着分子生物学的发展,现代遗传学研究中很多都需要提取果蝇的DNA以及RNA。果蝇是属于昆虫纲双翅目,形态上也非常接近,那么应该如何提取果蝇的DNA及RNA呢?
从果蝇幼虫或成虫头中分离RNA似乎有点困难,主要是由于角质层的存在。角质层是一种保护性外骨骼,由不溶性胶原蛋白、糖蛋白和脂质等组成。虽然去除角质层可能需要一些力,但可以很容易地做到这一点,而且不会影响RNA的产量或纯度。
提取RNA主要的敌人是RNase(核糖核酸酶),它可能会悄悄消化掉所有的RNA。RNase是无处不在的,可能在你的手上、头发上、衣服上,等等。在开始RNase消化掉任何RNA之前,用多样品组织研磨仪直接将果蝇部分组织进行湿磨,确保RNA不会流失。
上海净信的工程师为此来到了华中科技大学生命科学院,和专门从事果蝇研究的老师进行了一场关于“提取果蝇(昆虫)DNA解决方案”的相关性实验
张珞颖课题组
研究方向:
(1)研究人类突变影响睡眠或昼夜节律的机理;
(2)挖掘和鉴定新的睡眠基因和生物钟基因,研究其调控睡眠或昼夜节律的机理;
(3)研究睡眠和生物钟对情绪、学习记忆、新陈代谢等生命过程的影响及调节机理,从而探索睡眠和生物钟的功能。
主要研究动物:果蝇
实验操作:2ml离心管,常温,研磨珠:3mm氧化锆钢珠2倍标本体积;按照要求调整好参数
研磨仪安装调试完毕显微操作取果蝇头部
样品的准备(图1)放入研磨珠(图2)
研磨效果,均匀细腻
此实验方法为湿磨方法,经多样品组织研磨仪研磨后,在做DNA、RNA实验检测的效果非常好。
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