经常制备单细胞悬液的科研人员常会遇到这样的困扰:即便严格遵循既定步骤操作,制备出的单细胞悬液活率却依旧偏低,这背后究竟隐藏着哪些不为人知的原因呢?
相关原因介绍
01、酶的影响
用不同消化酶制备单细胞,活率是不同的。如果酶的消化能力较低,容易消化不充分,残留的细胞团会影响细胞活性;如果酶的消化能力很强,容易消化过度,损伤细胞膜,造成细胞活率偏低,因此,合适的消化酶至关重要。
02、时间把控
细胞离体时间越久,死亡率越高,找到合适的酶,短时间内制备好,细胞活率较高;时间过短时,组织还没消化好,活率也是不佳的,要探究合适的消化时间。
03、样本取材
①组织类型:神经、胰腺等一些组织细胞间连接紧密,细胞脆弱,分离时易受损,如果组织受损,尽量避开损伤部位取材。
②组织处理:组织血液较多时,要多次清洗,洗掉表面粘连的红细胞;组织本身血液较多时,做完后要裂红,避免红细胞碎片影响细胞活率。
③样本保存与运输:保存时间过长、温度不适或运输过程震荡等,会使细胞缺氧、代谢异常,活性下降。
04、操作环境与人为因素
①无菌操作:操作过程中微生物污染,会与细胞竞争营养、产生毒素,导致细胞死亡。
②操作熟练度:操作人员技术不熟练,增加细胞在体外的暴露时间,使细胞活性受损。
上海净信的单细胞悬液制备仪,可有效避免以上原因,搭配专属的消化酶试剂盒,能够根据不同的实验需求精准选择最适宜的消化酶。简化了操作步骤,操作简单,每一款仪器都经过大量的实验验证,精准匹配最佳程序,显而易见的提升制备的单细胞活率与得率,提高实验的整体效率。
案例展示
案例一:
小鼠脾脏单细胞悬液制备
台盼蓝染色、细胞计数仪计数
细胞活率99%
小鼠脾脏
案例二:
小鼠肺单细胞悬液制备
PI染色,流式分析结果
细胞活率98.67%
小鼠肺
案例三:
小鼠肝单细胞活率
台盼蓝染色,细胞计数仪局部图片
小鼠肝
案例四:
小鼠胰腺单细胞悬液
细胞计数仪检测报告
小鼠胰腺
仪器展示
上海净信现有JX-DLDXB和JX-CKSM两款仪器可供选择。JX-DLDXB款专为处理量大的实验场景设计,其每个管道均可独立运行,轻松应对大规模的单细胞制备任务;而JX-CKSM款则完美契合临床穿刺等特殊实验需求,虽然每管处理量相对较少,但却能实现高效的批量处理,为单细胞制备提供强大助力。